为什么用100—500umol双氧水给细胞1h造模，完全培养基培养24h，cck8测活性，没有明显剂量效应，有的浓度高的还促进。

可能有以下几个原因:

1. 双氧水的处理时间太短。1小时可能没有充分发挥双氧水的细胞毒性作用。可以考虑延长处理时间,例如24小时。

2. 双氧水在完全培养基中的不稳定性。双氧水在含有蛋白质、氨基酸、维生素等成分的培养基中会快速分解,其细胞毒性效应可能被减弱。可以考虑在无血清的培养基中进行处理。

3. 双氧水促进了细胞增殖。低浓度双氧水可能作为Reactive oxygen species (ROS)起到信号分子的作用,激活了细胞增殖通路。可以检测增殖相关基因和蛋白的表达。

4. CCK-8试验灵敏度不够。可以考虑更为敏感的细胞活性检测方法,如LDH释放试验。

5. 双氧水的稳定性问题。双氧水容易挥发和分解,处理浓度可能存在误差。可以尝试精确计时加入双氧水,保证处理时间一致。

使用100-500μmol/L的双氧水处理细胞1小时后，完全培养基培养24小时，CCK8测定细胞活性时，没有明显的剂量效应，有些高浓度的处理甚至会促进细胞生长，这可能与以下因素有关：

1. 双氧水的浓度和处理时间：在实验中使用的100-500μmol/L双氧水浓度可能不足以引起细胞的明显损伤，或者处理时间不足以产生明显的生物学效应。可以尝试增加双氧水的浓度或处理时间，以产生更明显的剂量效应。

2. 细胞类型和状态：不同类型和状态的细胞对双氧水的敏感性可能不同。有些细胞可能对双氧水的处理具有较强的抵抗力，而有些细胞则可能对双氧水的处理比较敏感。在实验中，可以尝试使用其他类型或状态的细胞，以观察它们对双氧水的反应。

3. 细胞培养条件：细胞培养条件对细胞的生长和代谢活动具有重要影响。在实验中，可能存在一些细胞培养条件不适宜的因素，如pH值、温度、湿度、培养基成分等，这些因素都可能影响细胞的反应和生长。

双氧水的作用机制是通过生成活性氧（ROS）来对细胞进行氧化应激反应。在低浓度下，双氧水可以促进细胞的增殖和代谢；而在高浓度下，则会对细胞造成损伤和细胞死亡。因此，双氧水的浓度是影响其作用的关键因素。

在您的实验中，使用了不同浓度的双氧水处理细胞，并在处理后的24小时内进行了CCK8测定。结果显示，没有明显的剂量效应，有些浓度高的甚至还促进了细胞活性。这种结果可能与细胞类型、细胞密度、双氧水的处理时间、培养基组成等因素有关。

双氧水稳定性差，很容易失效。

排除是否失效，可以适当延长造模时间