梁工1315
第一轮ELISA检测挑选到OD值为1.7的杂交瘤,把100ul细胞悬液转移到24孔板,加1ml培养基,本计划扩大培养再检测确认一次,第2天和第3天镜检观察细胞有增殖,但是第5天后细胞状态变差,半量换液后继续培养,细胞状态仍然很差。这种问题的原因是转移培养的过程中出现了操作出了问题是吗?
huarenqiang5
建议接种密度1-2x105cells/mL,另外复苏时可加5%胎牛血清于无血清培养基中。
土井挞克树
先排除一下污染问题,状态不好大概率是被污染了
loveliufudan
以下是一些可能导致细胞状态变差的原因:
1. 操作问题:在细胞转移过程中,操作不当可能导致细胞受到机械损伤或感染。例如,使用不适当的技术或工具、温度变化、污染的培养皿等都可能对细胞健康产生不利影响。
2. 培养条件问题:细胞培养的成功与培养条件密切相关。如果培养条件不正确,如培养基成分、温度、pH值、CO2浓度等不合适,都可能导致细胞受到应激并影响其生长和状态。
3. 细胞特性问题:不同细胞株具有不同的生长特性和要求。有些细胞对培养条件的敏感性较高,容易受到环境变化的影响。细胞株的特性和适应性可能对其在培养过程中的表现产生影响。
4. 污染问题:细胞培养过程中的污染,如细菌、真菌或霉菌的感染,会对细胞健康和状态产生负面影响。这可能导致细胞的增殖受阻或细胞死亡。
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