js-1细胞

注意事项:1)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；2)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

JS-1细胞培养方法和注意事项主要有以下几点：

- JS-1细胞的完全培养基为DMEM高糖培养基，添加10%胎牛血清、100 U/ml青霉素和100 μg/ml链霉素。

- JS-1细胞的传代比例为1:2或1:3，传代周期为2-3天，传代时要注意去除浮游细胞，只保留贴壁细胞。

- JS-1细胞的冷冻保存液为含有10% DMSO的完全培养基，冷冻保存时要避免反复冻融。

- JS-1细胞在运输过程中容易发生细胞脱落，这是正常现象，可按照说明书中的方法进行处理。

培养方法：

1. 吸走用于培养基，加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞。

2. 吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面，培养瓶放37度培养箱消化；（细胞对于消化比较敏感，消化过度会严重影响细胞状态，导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落，可以轻轻吹下时即可终止，禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔，不要吹出大量气泡。）

3. 加入6-8ml完全培养基终止消化，轻轻吹下细胞混匀。

4. 将混匀的细胞1000rpm（约150g）离心3min，弃上清，再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养。

传代比例 : 不同细胞生长速度不一，具体传代比例视细胞生长速度而定，大部分细胞适用1:3-1:4传代，生长较慢的细胞可以1:2传代。