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        最近在做3t3-l1细胞的转染,但是发现荧光要么不均匀,要么就是很弱,请问怎么提高转染效率呢?

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        巴啦啦能量-wy


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        3 个回答

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        huarenqiang5

        有帮助

        1.选择合适的转染试剂

        2.保持最佳的细胞状态

        3.选择高效的转染方法

        4.确保所构建载体的质量。

        user-title

        sswei

        有帮助

        一个原因是目的基因影响了荧光蛋白的结构,从而使荧光看起来不是那么亮了

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        要提高3T3-11细胞的转染效率,可以尝试以下几种方法:

        1. 优化转染条件:确保使用高质量的转染试剂,并按照厂家提供的说明书进行操作。注意控制转染试剂和DNA的比例,并避免过度稀释或浓缩。

        2. 优化细胞密度:将细胞在转染前适当扩增,以获得足够数量的细胞。一般来说,细胞密度应该在对数生长期,但不能过于密集,以免影响转染效率。

        3. 使用合适的转染方法:尝试使用不同的转染方法,如化学法、电穿孔法或病毒载体介导的转染,以确定哪种方法适合您的细胞系。

        4. 优化转染时间和条件:对于3T3-11细胞,最佳转染时间可能会有所差异。尝试不同的转染时间和条件,例如转染剂的孵育时间、DNA与转染试剂的配比等。

        5. 使用筛选标记:如果您的目的是稳定表达目标基因,可以使用带有筛选标记(如抗生素抗性基因)的表达载体,通过选择性培养,筛选出成功转染的细胞。

        6. 考虑使用辅助因子:对于一些难转染的细胞系,使用辅助因子如聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine,PEI)或类似的增效剂可能有助于提高转染效率。

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