对于贴壁不牢的细胞，怎么让它更牢固？

1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度；

2.分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物；

3.使用无菌酸溶液调整pH值或充入无菌CO2 ；

4.启用新的保种细胞 ；

5.调节最佳接种细胞浓度。

可以尝试添加血清，因为血清中含有促贴壁因子，而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子，细胞的贴壁效果会下降很多。

培养瓶或者培养皿的材质对细胞贴壁影响超级大，可以换个其他的培养皿试一试

可能原因：

1.胰蛋白酶消化过度 ；

2.支原体污染 ；

3.培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；

4.细胞老化 ；

5.接种细胞起始浓度太低或太高 。

解决方法：

1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度；

2.分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物；

3.使用无菌酸溶液调整pH值或充入无菌CO2 ；

4.启用新的保种细胞 ；

5.调节最佳接种细胞浓度。

这个没什么好办法，贴壁不牢的吹洗掉就可以了，然后留下来的就是贴壁牢固的。

要么就是多培养一段时间，不要频繁更换培养基试试。