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        SHSY-5Y细胞如何减少聚团?

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        dxy_h665dh78

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        4 个回答

        user-title

        是TTT

        有帮助
        1. 调整消化时间:细胞一旦在显微镜下消化成圆球状 立即终止消化,切勿过度
        2. 现有细胞立即消化下来,重新混匀细胞,在镜下观察到细胞均匀单个分散为止
        3. 调整传代比例,如果细胞仍旧成团,那么增加传代比例
        user-title

        z流沙z

        有帮助

        细胞消化后进行离心,再重悬混匀

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        SH-SY5Y细胞非常敏感,在受到温度、化学或物理刺激后容易出现成团现象。一个视野下,有少量成团现象,无需特殊处理。成团几乎没有铺展开的细胞时,就需要按以下方法特殊处理一下了。


        成团处理方法

        方法1:低密度接种,用0.125%的低浓度胰蛋白酶消化细胞(时间不超过5min),按1:6比例传代接种,并换新的培养器皿。延长换液时间,3天换液一次,防止细胞脱落。

        方法2:使用多聚赖氨酸包被的培养器皿,以加快细胞贴壁速度,降低细胞聚集成团的几率。

        方法3:重新铺板,并更换新配制的培养基,并加大血清比例(不超过20%)


        方法4:接种时,减少培养基量(如T25加3mL)以加快细胞贴壁速度,等待细胞贴壁后(约8-12小时),再补加培养基。


        预防成团的方法:

        ·控制细胞密度不超过80%,当密度到达或超过80%及时传代;传代时切勿暴力吹打,避免对细胞造成机械刺激

        ·使用质量好的培养基和胎牛血清,减少内毒素等有害物质对细胞的刺激

        ·请勿频繁把细胞从培养箱拿出,气温低时需开暖气维持细胞房温度;使用PBS、培养基前37度预热,以避免温差对细胞造成刺激

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        把握好消化时间,消化不好时候就是容易聚团

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