• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        PCR产物跑胶,产物堵在了孔里是怎么回事呀 所有的情况都试过了,还是堵在孔里.?

        user-title

        土井挞克树

        PCR产物跑胶,产物堵在了孔里是怎么回事呀 所有的情况都试过了,还是堵在孔里.?

        wx-share
        分享

        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        可能是因为DNA产物与酶进行结合了,导致堵在胶孔里跑不下来,可以加一点SDS然后再跑胶图,就可以分开了,就不会堵在胶孔里了。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        琼脂糖凝胶没有凝好或着样品中混入了杂质

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果PCR产物在跑胶过程中堵在了孔里,可能有以下几个可能的原因:

        1. PCR产物浓度过高:高浓度的PCR产物可能在跑胶过程中堵塞孔口,尤其是较小的孔。请尝试减少PCR产物的量,稀释样品,或降低PCR循环数以减少产物浓度。

        2. 孔口堵塞:孔口可能被胶体颗粒、残留琼脂糖胶或其他杂质堵塞。确保在装载样品到凝胶孔中时避免气泡和杂质的进入。清洗凝胶孔或更换凝胶,确保凝胶孔干净。

        3. 引物设计问题:请确保引物的设计是特异性的,避免非特异性扩增或产物的剪切重组。重新设计引物,确保其特异性和可靠性。

        4. 增加堆载缓冲液:在装载PCR产物到凝胶孔时,使用足够的堆载缓冲液,以确保产物可以顺利进入孔中,而不被堵塞。

        5. 凝胶条件优化:优化凝胶电场条件,包括电场强度和运行时间。这有助于产物在凝胶中迁移得更顺利。

        如果您已经尝试了上述措施,但PCR产物仍然堵塞在凝胶孔中,可以考虑尝试其他凝胶类型(如聚丙烯酰胺凝胶或聚酰胺凝胶)或其他分离方法(如毛细管电泳)。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序