• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        请问诱导成功的贴壁脂肪细胞,取出一部分使用后,剩余的细胞怎么保存啊?重新种回去细胞也不会再贴壁了,冻存可以吗?冻存条件呢?

        user-title

        豆豆是个豆


        wx-share
        分享

        6 个回答

        user-title

        来一起探讨

        有帮助

        可以将近剩余细胞进行接着培养,也可以进行冻存,冻存时,注意DMSO与血清的比例,1/9,或是DMSO,血清,培养基比例为1/2/7,-80℃可短期冻存,若要进行长期冻存可保存在液氮罐中。

        user-title

        是TTT

        有帮助

        可以冻存的,-80条件冻存就可以了

        user-title

        dxy_mqg1dtg8

        有帮助

        诱导成功剩余贴壁脂肪细胞,可以进行冻存保存。冻存条件需要遵循以下几个方面:

        1. 冷冻液的选择:可以使用含有10% DMSO(二甲基亚砜)和90% FBS(胎牛血清)的冷冻液,或者使用含有10% DMSO和90% DMEM(高糖培养基)的冷冻液。

        2. 冷冻过程:将细胞平均分配到冷冻管中,缓慢加入冷冻液,然后放置在-80℃的冷冻箱中进行冷冻保存。

        3. 解冻过程:将冷冻管迅速放入37℃的水浴中除霜,然后将细胞转移到预先加热的培养基中进行恢复。在解冻过程中要注意避免冷冻液中的DMSO对细胞造成的毒性效应。

        需要注意的是,冻存的细胞会有一定的死亡率,因此在冻存前最好进行细胞的扩增,以保证有足够数量的细胞用于后续的实验。同时,在冻存前可以进行细胞的鉴定和检测,以确保细胞的正确性和纯度。

        user-title

        沫子大大

        有帮助

        贴壁脂肪细胞是通过诱导培养得到的细胞,通常可以在培养皿中通过贴壁培养的方式进行保存。如果您需要保存剩余的贴壁脂肪细胞,可以将其继续进行贴壁培养,并定期更换培养液。此外,您还可以将其冻存,以备将来使用。

        冻存贴壁脂肪细胞需要注意以下几点:

        1.选择适当的冻存

        液:一般来说,常用的冻存液有10% DMSO、20%FBS等,但是对于贴壁脂肪细胞,最好选用适合其生长的冻存液。

        2.冻存前进行适当的

        处理:在冻存前,需要将细胞进行处理,比如使用酶来消化细胞,使其成为单细胞悬液状态。

        3.控制冻存速率:细

        胞冻存的速率对于冻存效果至关重要,一般来说,应该控制在每分钟1℃左右。

        4.储存条件:冻存后

        的细胞应该储存在液氮罐中,保持在-80℃以下。

        需要注意的是,冻存后的细胞在解冻后可能会失去一部分活力,所以建议在需要使用时,进行复苏培养处理,以提高细胞的存活率和质量。

         

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以液氮负八十度冻存三个月左右。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        贴壁脂肪细胞可以通过冷冻保存的方式进行长期保存。以下是一些常见的冻存条件:

        冻存液体的制备:一般使用DMSO作为冻存液体。将DMSO加入培养基中,最终浓度为10-20%。混合均匀后用1ml装入冻存管中。

        细胞冻存:将培养后的脂肪细胞洗涤干净,加入到冻存液体中,并混合均匀。将混合物分装入2ml冻存管中,然后将冻存管缓慢冷却至-80℃。

        长期保存:经过缓慢冷却后,将冻存管转移到液氮罐中进行长期保存。

        复苏:需要使用预先加热的10% FBS的完整培养基复苏细胞。将冻存管迅速解冻并将其在37℃的水浴中加热,直到完全融化。然后将细胞转移到细胞培养板中,并在37℃、5% CO2的条件下进行培养。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序