CHO-S细胞在培养的过程中总是有很多结团沉淀，究竟是什么原因？？？

1.培养条件不当：CHO-S细胞在培养的温度、pH值、营养成分等方面都有着严格要求，如果这些因素不能得到良好控制，就有可能影响细胞的生长和代谢，进而导致细胞结块或沉淀。

2.细胞密度太高：CHO-S细胞在高密度培养时容易形成结块或沉淀，特别是在无血清培养体系中更为明显。因此，在进行CHO-S细胞培养时，需要根据细胞的状态和具体情况来调整细胞密度，以避免细胞结块或沉淀。

3.静置时间过长：如果在无搅拌或轻微搅拌的条件下培养CHO-S细胞，并且静置时间过长，细胞就会逐渐沉淀并形成结块。

1. 过度消化，某些用于组织分解的酶，如胰蛋白酶，如果过量使用会导致细胞结块；

2. 环境压力，物理压力和反复的温度变化会导致细胞死亡，从而导致细胞的“粘性”的DNA分子将相邻的细胞连接在一起；

3. 组织分解，在制备单细胞悬浮液时，使用酶、机械或化学分解策略可使细胞破裂，从而导致碎片的聚团；

4. 过度生长，当细胞在其培养基中密度过大的时候，细胞将开始溶解并释放碎片，碎片中的粘性因子会将细胞聚集到一起

减少细胞结团办法:

1. 低密度传代。将已聚集的细胞进行消化传代，连续传三次，细胞抱团就会越来越小，这样几代过后，再按照常规消化方法和时间能将细胞逐渐传成单个细胞；

2. 选择适当的离心转速和时间离心聚团细胞。通常情况下，较快的速度可以离心散细胞，但在高速下也必须考虑细胞的脆弱性，所以适当的延长离心的时间也不失为一种较好的将悬浮聚团细胞离心散开的方法，但转速及时间要通过实验来把握。

3. 添加DNA酶I的内切酶。可以混合到培养基中，从破裂的细胞中分离DNA，分解这些多余的碎片有助于保持靶细胞生长的空间。但是，dna酶I使用过多会导致细胞突变，最终会影响实验效果，所以不到万一，不建议使用。

4. 添加低分子量葡聚糖硫酸钠盐。可以混合到培养基中，通过改变细胞表面电荷，促使单个细胞悬浮，防止结团，安全有效。

成团也可能是细胞太多了，因此在消化时应该延长消化的时间，同时传代时尽量吹散成单细胞悬液。