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        求助 | OCT包埋小鼠骨骼肌

        相关实验:骨骼肌形态学观察实验

        user-title

        鱼尾鱼尾

        我做小鼠骨骼肌冰冻切片的时候,没有进行蔗糖脱水就直接包埋了,然后切的时候发现组织含水量太大了,想问下大家可以化了OCT再重新组织蔗糖脱水么

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        3 个回答

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        脱水的目的是防止冻的时候细胞被水形成的冰晶损坏,你这个冻过了,可能重新再脱水意义不大

        user-title

        sswei

        有帮助

        使用30%蔗糖在常温下进行1小时脱水,组织形态不会发生改变,对组织的影响也较小。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        可以使用OCT重新包埋并进行脱水。下面是具体的步骤:

        将切片从玻片上取下,用PBS或生理盐水洗涤去除OCT。

        将切片转移到新的OCT中,用刀片或针头调整切片位置,使其位于适当的位置。

        将包埋好的切片置于-20℃的冰箱中,待OCT完全固化。

        将固化的切片用微型切片机切片并收集到盛有蔗糖溶液的离心管中。

        在4℃下将离心管离心,使切片沉淀到蔗糖溶液中。

        将蔗糖溶液中的切片转移到新的离心管中,加入新鲜的蔗糖溶液,重复上述步骤,直至切片完全脱水。

        最后将切片转移到玻片上,并进行染色或其他实验。

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