跪求CGM-1细胞培养的protocol，细胞养死了，呜呜😭

细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。弃去培养上清，PBS 润洗细胞 1-2 次，加入胰酶置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，至拍拍培养皿侧壁后细胞大部分变圆并脱落即可，加培养基终止消化，1000RPM离心 5分 钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀铺板。

CGM-1细胞是一种常用于研究某些病毒感染机制的细胞系，以下是CGM-1细胞的一般培养方案：

培养基准备：

将DMEM（高糖）中加入10%（v/v）胎牛血清、1%（v/v）L-谷氨酰胺和1%（v/v）青霉素/链霉素混合液，混匀后滤过灭菌，即可得到CGM-1细胞的培养基。

细胞培养：

将CGM-1细胞接种于25cm2或75cm2的培养瓶中，密度为5×104至1×105个/ml，放置于37℃的细胞培养箱中，5% CO2的湿度条件下培养。每2-3天更换一次培养基，直至细胞达到80%-90%的密度。

细胞传代：

当CGM-1细胞密度达到80%-90%时，将细胞从培养瓶中解除，收集后用PBS洗涤3次。然后加入胰酶（如0.25% Trypsin-EDTA）消化，消化约5-10分钟，观察细胞形态是否变圆，用培养基终止消化，离心收集细胞。将细胞重新接种至新的培养瓶中，继续培养。建议每3-4天传代一次。

需要注意的是，细胞的培养过程中，应该严格控制无菌条件，并注意细胞密度和培养基的更换周期。此外，不同的实验可能需要根据具体要求对培养基和细胞处理方法进行调整。如果细胞养死，可以检查细胞培养条件、培养基配方等，以找到问题所在。