HUVEC细胞为什么消化不成单细胞？消化时细胞间有细丝相连？

你消化时间太长了，这个细胞消化30-60s就行了，均匀滴加胰酶以后稍微摇匀，等半分钟左右晃动敲打，看到细胞掉下来了以后，马上终止消化。

正常应该这样，消化要快一点。

细胞在培养箱消化后取出拍一拍侧壁，看看细胞能否飘下来，一般来说圆状已经差不多了，轻轻吹打后移至离心管，1000rpm离心5min，去上清后加入1-2ml培养基轻轻吹打混匀，按需铺板。如果细胞出现老化空泡等问题，证明细胞消化过度，应适当减少消化时间，另外细胞培养密度要适宜，不适合天天或者隔天消化。

人脐静脉内皮细胞一般消化30秒就消化好了，你消化2min时间属实有点长了，可能导致过度消化影响细胞状态。

可能原因如下:

1.细胞死亡释放出DNA,缠绕其他细胞,形成黏性的细胞团(消化的过程可能过于粗暴,吹打太用力,消化太久,消化液太强或有毒性等)。

2.细胞离心速度过大或时间太长。

3.消化不完全的时候,细胞和细胞之间的连接没有分开;消化过度的时候,圆形的细胞容易聚堆,再分开很困难!

4.状态不好、老化的细胞,也可能会出现抱团生长的情况。

可以增加胰酶的浓度，或者另外添加胶原蛋白酶进行消化

是不是胰酶的问题，活性不太好了

消化不成单细胞有以下可能原因：

胰酶的浓度不够或者消化时间不够长。可以尝试增加胰酶浓度或者增加消化时间。

细胞过老或者过密。长时间的细胞传代可能会导致细胞老化、聚集，从而难以消化成单细胞。

细胞的附着力过强。可以尝试使用EDTA或者其他解离剂来削弱细胞与培养基或者基质的黏附力，帮助消化成单细胞。

操作不当。可能在操作过程中过于粗鲁或者未均匀加入胰酶，导致消化不均匀，出现难以消化成单细胞的情况。