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        细胞转染后难消化不知道原因

        相关实验:细胞传代实验

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        绿茵不减来时路

        CHO细胞一分钟就能消化下来,转染质粒挑了单克隆养起来之后,消化就特别难吹下来,不知道为啥

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        5 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        用pbs冲洗打散后再吹会好一些。

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        dxyc42u

        有帮助

        有可能是细胞分化了,下次延长消化时间

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        loveliufudan

        有帮助

        转染质粒进入细胞后,如果质粒成功被细胞摄取并表达,那么质粒DNA就会被细胞转录和翻译成蛋白质,从而达到我们所需的目的。然而,有时候质粒表达的效率并不理想,这可能会导致质粒留在细胞中的时间更长,使其难以消化。

        以下是可能导致难以消化的一些原因:

        基因表达水平:质粒表达的水平可能很高,这可能导致细胞在短时间内产生大量的蛋白质,从而使细胞更难以消化质粒。

        质粒大小:一些质粒可能比其他质粒更大,这些大质粒可能比较难被细胞消化。

        细胞类型:不同的细胞类型对质粒消化的效率可能不同。所以,即使在CHO细胞中转染质粒容易被消化,但在其他细胞类型中却不一定。

        质粒的纯度:质粒的纯度可能会影响质粒消化的效率。如果质粒中有其他DNA或蛋白质污染,这些杂质可能会影响质粒消化的效率。

        因此,如果您的质粒在CHO细胞中难以消化,您可以尝试一些策略来提高质粒表达的效率,并且可以考虑调整转染质量、细胞数目、转染时间、质粒浓度等因素。另外,您可以考虑尝试其他细胞类型,以找到更适合您的实验条件的细胞。

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        sswei

        有帮助

        可能存在胰酶不足,pH变化等情况

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        huarenqiang5

        有帮助

        原因有如下几点:


        (1)细胞本身贴壁生长的能力较弱,一般细胞在塑料器皿上的贴附能力强于玻璃器皿。


        (2)培养液PH问题。


        (3)消化时候处理不合适。

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