细胞共培养

你这个情况可以用小室进行培养。

可以用小室培养，贴壁的需氧的在上层

要研究B细胞分泌的细胞因子对A细胞的影响，需要进行共培养实验。为了避免细胞接触不良，可以将B细胞和A细胞分别在上室和下室培养，并通过筛隔膜进行交流。在共培养实验的过程中，应该在B细胞的培养基中加入抗生素来避免细菌污染，并且在共培养过程中，还需要添加丙酮酸钠（Sodium pyruvate）、非必需氨基酸（Non-essential amino acids）等营养物质以提供足够的营养物质供细胞生长。

关于细胞培养的具体操作，一般可以按照以下步骤进行：

选择合适的培养基，确保培养基中含有足够的营养物质和生长因子。对于贴壁细胞A，可以选择DMEM等适合的培养基，对于悬浮细胞B，可以选择RPMI-1640等适合的培养基。

将细胞分别在上下室中培养，确保两种细胞不会接触。

收集A细胞，进行RNA提取等后续实验。

在共培养过程中，可以根据具体实验目的来加入不同的试剂，例如某种细胞因子、药物等，然后根据实验设计进行相应的处理。

需要注意的是，在进行共培养实验时，应该控制好两种细胞的密度和比例，以避免一方细胞数量过多或过少导致实验结果不可靠。此外，也需要控制培养时间和温度等因素，确保实验条件的一致性。

细胞共培养方法主要包括直接接触共培养、间接接触共培养和三维细胞共培养。

1、直接接触共培养

在合适的条件下, 将2种或2种以上细胞按照一定比例共同培养在同一培养皿中。

适用于体内邻近的组织细胞以及2种生长状态相同的细胞，主要用于研究细胞间相互作用以及诱导细胞分化。

2、间接接触共培养

①条件培养基共培养法：用培养过一种细胞的培养基培养另一种细胞，2种细胞不直接接触，而细胞因子可以交流，其优点是可以消除目的细胞对条件细胞的影响，突出条件细胞对目的细胞的作用。

②“爬片式”共培养法：将一种细胞先接种在处理后的玻片上，待细胞贴壁后，以一定比例放入另一种细胞的培养皿中与其共培养。

③嵌入式细胞共培养法（Transwell小室）：Transwell小室是一类有通透性的杯状装置, 杯子底层放一张有通透性的膜,一般常用的是聚碳酸酯膜,孔径大小有0 .1～12 .0 μm。将Transwell小室放入培养板中, 细胞A种在上室内,下层种植的细胞B培养液中的成分可以影响到上室内的A细胞,从而可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A生长、运动等的影响。

3、三维细胞共培养

选用微结构或生物降解材料创造三维共培养微环境。

文中指嵌入式细胞共培养法，供参考。