从ATCC购买的T47D-KBLUC细胞复苏后一周不贴壁，台盼蓝染色后细胞是活细胞，为什么？

主要考虑以下几个方面：

1、胰酶处理时间。

2、缺少贴壁因子。

3、支原体或细菌的污染。

4、培养液配置、储存不当，如pH值过碱，Gln量太少等原因。

5、复苏的细胞本身状态不好，已经老化，失去贴附性。

6、接种细胞数目太少，无法分泌足够的细胞外基质。

7、复苏时处理速度太慢，复苏过程不当。

换一下培养皿，或加点促贴壁试剂试试，有的时候，可能不是细胞的问题，是耗材的问题。

适当提高细胞密度然后加入营养血清再观察