MRC-5细胞复苏后状态极差，比例是5:4:1，是说明书推荐比例，有必要提高血清浓度吗？

有可能是没冻好，建议更换成品的冻存液

细胞复苏的状态差吗？你是不是消化过度了，你也可以做一个支原体污染的检测或者细菌污染检测看看。你可以对你的培养基做一个促生长实验，用来证明每批配制的培养基，都可以支撑细胞的正常生长。

1.细胞冻存时间太长。2.细胞冻存时密度过高或过低。3.培养基问题：复苏细胞时最好采用优质的胎牛血清，还要注意培养基的酸碱度是否合适。4.吹打细胞时过猛，细胞吹破了。

复苏的细胞状态极差，可能是跟你冻存过程降温有关，再者冻存的细胞数太少也有可能影响细胞复苏后的存活。