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        rtPCR结果分析

        相关实验:细胞免疫荧光

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        糖糖要成功

        昨天做了实时定量荧光表达rtPCR,想咨询各位大神 具体怎么进行结果分析,求详细指导,拜托拜托了

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        4 个回答

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算;2、一般都是相对量,则用delta delta CT方法来计算;3、引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性;4、模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起;5、看CT值是分析荧光定量PCR最直观的一个数据,CT值一般在35左右就失去参考价值了,平时我们实验室用BIODAI-PCR荧光定量法测得的扩增曲线的起跳值基本在30左右。

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        whilt-shirt

        有帮助

        可以建一个Excel,里面设好公式,结果放进去就能直接得到-2ΔΔCT值

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        cq值有没有超过35,超过不可信,溶解曲线是不是单峰,不是单峰的话引物要换,结果计算按照2的负▲▲CT值。

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        结果首先看cq值齐不齐以及曲线光滑吗,判断结果可不可用,然后计算表达量看有没有差异

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