求应用荧光分光光度计检测细胞内ph的方法

近中性pH的检测

BCECF及其膜渗透性AM酯是用于测量细胞内pH的最广泛使用的荧光pH指示剂。它的pKa约为6.98，非常适合测量各种细胞类型的胞质中的pH变化，以及监测近中性环境中的pH变化。BCECF在〜504 nm处有一个最大吸收，在〜440 nm处有一个等吸收点，在〜527 nm处有最大发射。尽管BCECF具有双重激发的比值特性，但一些特性使比值成像不理想。其等吸收点与最大激发之间距离较大，细胞内保留性较差以及在440 nm处的弱吸收，都导致其信噪比较低。此外，BCECF以异构体的复杂混合物形