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        细胞培养过程中,发现贴壁细胞表面沾了很多死细胞,传代过程中一直存在怎么破?

        user-title

        dxywode

        细胞培养过程中,发现贴壁细胞表面沾了很多死细胞,传代过程中一直存在怎么破?

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        4 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        胰酶消化一下细胞,然后等细胞贴壁后。尽早换液。一般你说的这种是细胞扎堆生长,顶上的细胞容易死

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        用 PBS 洗两遍之后,加胰酶进去,晃一晃,迅速将胰酶倒出,再用 PBS 洗一下,再加胰酶正常消化。死细胞由于粘附能力很弱,第一次加胰酶进去以后会掉下来,第二次加胰酶下来的细胞才是活性比较强的细胞。整完一次之后,再次传代方法同上,一般 2~3 次之后,细胞就完好如初了。

        user-title

        Keven轩

        有帮助

        建议最近一次传代传稀一点,然后换几次液不要传代,降低离心速度看看是否改善

        user-title

        未来9

        有帮助

        细胞逐渐死亡的可能的原因有:

        培养箱内无CO2;培养箱内温度波动太大;细胞冻存或复苏过程中损伤;培养液渗透压不正确;培养液种有毒代谢产物堆积等

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