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        细胞培养过程中碰到的小黑点,到底是什么啊,一直都有

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        dxy_gwrp7ndq

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        5 个回答

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        丁香清香

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        在细胞培养中常可见到细胞及培养液中有一些大小不等、形态不同的黑色未知颗粒。

        有可能是细胞碎片或者污染如:支原体、真菌和寄生虫等

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        bamboopiggy

        有帮助

        大概率是血清不好,导致细胞状态差,只要实验组和对照组都有,结果也符合预期,就凑合着吧,要不就买好血清

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        天一湖医者

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        不动的小黑点,细胞碎片或支原体污染

        解决办法:细胞出现黑点一般判定为细胞碎片或杂质,可参照以下进行:

        如果是悬浮细胞:收集细胞上清慢速离心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更换新的培养瓶。

        如果是贴壁细胞:将细胞用PBS洗2-3遍,洗的时候,轻轻拍打培养瓶,让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落,再弃去PBS,消化时先加低浓度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,让细胞间隙中的颗粒和碎片脱落下来,去掉低浓度胰酶,然后正常消化细胞,将收集的细胞悬液慢速离心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更换新的培养瓶,并可以尝试适当增加血清浓度进行培养。

        如果怀疑黑点是支原体污染,可进行支原体检测,检测阳性请及时将细胞处理后丢弃。比较珍贵的细胞,可以尝试使用支原体清除剂(如泰乐菌素等)去除,并与其他细胞分开培养。

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        未来9

        有帮助

        可能是:

        1、细胞碎片

        2、凋亡小体

        3、血清中的沉淀

        4、黑胶虫

        5、支原体污染

        需要具体分析判断

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        府宅

        有帮助

        细胞出现黑点一般判定为细胞碎片或杂质,可参照以下进行:

        如果是悬浮细胞:收集细胞上清慢速离心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更换新的培养瓶。

        如果是贴壁细胞:将细胞用PBS洗2-3遍,洗的时候,轻轻拍打培养瓶,让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落,再弃去PBS,消化时先加低浓度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,让细胞间隙中的颗粒和碎片脱落下来,去掉低浓度胰酶,然后正常消化细胞,将收集的细胞悬液慢速离心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更换新的培养瓶,并可以尝试适当增加血清浓度进行培养。

        如果怀疑黑点是支原体污染,可进行支原体检测,检测阳性请及时将细胞处理后丢弃。比较珍贵的细胞,可以尝试使用支原体清除剂(如泰乐菌素等)去除,并与其他细胞分开培养。

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