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        免疫荧光实验目标蛋白的荧光很弱,导致组间差异并不明显,造成假阴性结果是什么原因?

        相关实验:细胞免疫荧光

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        迟C迟

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        3 个回答

        user-title

        府宅

        有帮助

        通过文献等查找一下目标蛋白在该组织或细胞的表达丰度如何。若该蛋白本身表达就很少。

        如果抗体修复不充分,抗原表位未完全暴露,也会出现弱标记现象。比如,尽管大多数抗体都是在酸性环境中修复,但是也存在少量的抗体需要在碱性环境中修复,建议查看抗体说明书,严格按照其修复条件进行实验。

        user-title

        dxywode

        有帮助

        目标蛋白的荧光很弱,导致组间差异并不明显,造成假阴性结果,这种情况出现后,首先要检查一下抗体对不对,是否适用于你的预处理组织。一个典型的例子就是,有些抗体只适用于冰冻切片,但若将其应用于石蜡切片,就会造成弱标记或无标记现象。

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        whilt-shirt

        有帮助

        有可能是二抗原因,建议更换二抗

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