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大肠杆菌化转有什么高效方法吗

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dxy_bc98qdv3

需要转化2个质粒进去,目前的方法是先转化一个质粒进去,再做这个菌的化转感受态,再转另一个质粒进去。但是可能由于第二个质粒太大了(10000bp多),怎么转都没有成,双抗板上没有长菌。目前已经尝试了氯化钙化转、生工试剂盒、DMSO,效果都不是很好。由于质粒种类较多,电转不太现实,请问大家有好的方法吗

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