菌种保存与活化的问题

一般甘油浓度20-30%，-80度保存。

负20建议保存一周左右，一个月太长了

甘油菌变澄清可能与多种因素有关，例如甘油浓度、保存条件、操作不当等。首先，需要确认是否有可能操作不当导致菌液澄清。例如，在取样时可能引入了空气或者菌液被过度搅拌。

-20℃通常是保存甘油菌的理想条件。在保存期间，菌液的甘油浓度应该足够高（通常建议在20%以上）以防止冰晶形成，从而导致细胞破裂或损坏。

为了尝试复苏甘油菌，可以尝试以下步骤：

1. 将甘油菌样本从-20℃冰箱中取出，恢复到室温。避免将甘油菌直接暴露在室温中，以免温度变化过快导致细胞破裂。

2. 轻轻摇晃试管，检查菌液是否恢复澄清。

3. 若菌液仍处于澄清状态，可以尝试在显微镜下检查菌体的活性。如果观察到菌体活动，可以认为菌体仍有活性。

4. 若菌液已经恢复澄清并且观察到菌体活动，可以将菌液接种到新的甘油琼脂平板上进行划线培养。观察菌落生长情况，以确认菌体活性。

5. 若菌体未能恢复活性，可能需要重新筛选或者从其他来源获取甘油菌。

即使甘油菌样本在-20℃保存得当，也不能保证100%成功复苏。因此，建议在实验过程中，定期复苏和保存甘油菌，以降低实验风险。

可以的，一般保存在零下二十度是可以的

灭菌之后的甘油与菌种混合之后可以选择零下20度保存或者零下70度保存，一般实验室选择零下20度保存就可以了，零下20度保存时间可以达到一年左右，零下70度保存的时间更久，当然保存条件也更为苛刻，针对一般实验室来说取用也不方便。