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        如何准确的细胞计数方法?

        相关实验:细胞计数实验

        user-title

        丁香实验

        我的细胞计数要求要精确些,因为这涉及到后面细胞RNA提取中提取试剂的量。用细胞计数板计数不精确,而且费时,所以对这个问题很苦恼。

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        1 个回答

        user-title

        丁香实验

        有帮助

        如果你要做别的,我不好说,如果做RNA提取,
        不必太紧张,RNA提取很容易的,对细胞数的要求也不必太严格,
        可以说很松地依经验加上1-2ml裂解液就可以了,
        有你计数的功夫,RNA可就变质了,
        要记住,RNA在生长活跃的细胞中最好,
        任何的温度,渗透压等因素改变都会影响RNA的,这个过程可很快。
        所以,不要消化,洗涤,和计数、,直接把裂解液加上就可以了,经验比说明书更管用!!
        1.我讲过“有计数的功夫,RNA就变质了”指的是,在你计数过程中,必然要离心,洗涤,计数,这都是需要时间的呀,此事的环境必然不同于细胞的生长环境,细胞内部代谢则趋向于应激,或凋亡,一些因子的转录水平会发生变化,而RNA的半衰期很短,所以,细胞内的RNA谱发生变化,并且总RNA量会减少,应激状况下的细胞表达谱和生长活跃期是不一样的。
        2,白细胞内的RNA谱肯定在培养后是不一样的,关键看你的目的,或直接加TRizol,或加入不同因子,其中RNA谱肯定不同,但不是每种RNA都不同,关键看目的。如果观测患者自身因子,和用WBC得到特定基因的操作肯定不一样。

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