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        小鼠取材问题

        相关实验:小鼠解剖取材

        user-title

        奶啤au

        小鼠背部诱导的皮肤肿瘤,请问如何进行皮肤组织取材,怎么样用包埋盒固定做切片,如何保证皮肤不卷曲?

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        4 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        1.将实验小鼠脱颈处死,75%乙醇浸泡5min,固定,备皮,取背部皮肤至于含双抗的冷PBS缓冲液中。


        2.仔细剥离脂肪,血管等多余组织,PBS清洗,加胰酶消化1h。


        3.分离真表皮,去除表皮后,PBS清洗3次。


        4.将真皮部分于培养皿内剪碎,加入适量胰酶,转移至15ml离心管内,37℃恒温水浴消化1h。


        5.消化结束后,加入H-DMEM完全培养基终止反应,1000rpm离心5min,弃上清。


        6.PBS清洗一遍,离心弃上清。


        7.将清洗后的组织块均匀铺于6cm培养皿内,加入2ml完全培养基,37℃,5%CO2培养箱内培养24h。


        8.第二天,补充培养基至5ml,继续培养,3-4天后有细胞游出。


        9.7天后已有大量细胞游出,去除组织块并换新鲜培养基继续培养。



        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        进行小鼠皮肤组织的取材和包埋盒固定是进行切片制备的重要步骤。以下是一些建议来确保皮肤组织的取材和固定过程中不卷曲:

        1. 取材前的准备:

        - 使用新鲜的、尖端锋利的手术刀或剪刀,确保切口平整和准确。

        - 提前准备好冷冻盒和组织保存液,以确保组织的保存和保持完整性。

        - 在取材前,确保小鼠已经被适当麻醉,并遵循动物实验的伦理规定。

        2. 取材的技巧:

        - 将小鼠放置在合适的工作台上,确保操作区域干净整洁。

        - 使用手术刀或剪刀沿着皮肤瘤边缘进行切割,尽量保持切口平直,并避免扯断组织。

        - 尽量避免过度拉伸皮肤,以防止组织的损伤和卷曲。

        3. 包埋盒固定:

        - 将取得的皮肤组织立即放入含有合适的固定液(如10% 缓冲福尔马林)的试管中。

        - 在试管中固定组织的时间通常是根据组织大小和类型来确定的,可以参考相关文献或专家的建议。

        - 将固定后的组织转移到含有适当浓度的酒精(如70% 酒精)的试管中,以去除固定液。

        4. 制备切片:

        - 将固定并去除固定液的组织放入包埋盒中,使用熔化的石蜡将其浸泡。

        - 在组织固定后,将包埋盒放入冷冻盒中,并在冰上迅速冷却,以使石蜡固化。

        - 使用旋转式或滑动式切片机,制备具有适当厚度的组织切片。

        为了确保皮肤组织不卷曲,注意以下事项:

        - 在取材和处理过程中尽量避免拉伸组织,以防止损伤和变形。

        - 确保固定时间适当,以确保组织固定得足够坚硬,但不至于过度硬化。

        - 在包埋盒中安置组织时,尽量使组织平坦且没有皱褶。

        - 注意石蜡浸泡和固化的温度和时间,以避免组织卷曲。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        小鼠皮肤组织取材:

        1. 选取实验组和对照组,各选2只左右;

        2. 麻醉小鼠;

        3. 用剃毛器将小鼠背部皮肤毛发剃去;

        4. 用碘伏酒精涂抹取皮部位,用手术剪刀剪取背部皮肤;

        5. 用碘伏酒精涂抹取皮部位,放回饲养笼继续饲养;

        6. 将背部皮肤以真皮面朝下的方式平铺在滤纸上;

        user-title

        于小鱼鱼1998

        有帮助

        采取皮肤标本的方法主要有:手术切取法、环钻法、削取法等。




        其中手术切取最常用,适应于各种要求及大小不同的标本。切取时应注意:




        ①切缘锐利整齐;




        ②切口方向尽量与皮纹一致,两端对齐;




        ③应夹持组织两端,切忌夹持组织中间,以免夹坏组织影响观察;




        ④切取标本应足够深、足够大。此方法特别适用于肿块等皮下病变的取材,对所有脂膜炎、血管炎及脱发的鉴别宜采用手术切取法。同时提倡采用该方法对皮肤肿瘤进行检查。

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