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        小鼠脑黑质立体定位注射

        相关实验:小鼠尾静脉注射方法

        user-title

        xinyuexing

        各位老师:

        我准备给小鼠脑黑质立体定位注射腺相关病毒,但定位的具体位置文献不统一,求指教个准确位置。还有注射病毒后要给小鼠注射抗生素预防感染吗?具体抗生素名称和注射方法、剂量请一并指教,谢谢!

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        1 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        1. 利用某些颅骨外面的标志(如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢状缝等)或其它参考点所规定的三维坐标系统,来确定皮层下某些神经核团结构的位置.

        注意:操作为大鼠上门齿卡入横杆,调节旋钮压紧鼻杆;将耳杆插入大鼠耳道,平衡调节左、右耳杆,使大鼠两耳间连线与耳杆在同一直线上,保证左、右耳杆的刻度位置相同后调节旋钮锁紧耳杆。大鼠固定完好的判断标准:鼻对正中,头部不动,提尾不掉,目测大脑放置水平(使颅骨水平)。

        2. 前囟点即Bregma点,位于冠状缝和矢状缝的交接处,以其作为颅骨三维坐标系统原点O。

        3. Bregma点定位过程大体分为: 选定脑部靠中间的位置。剪除大鼠顶被毛后,用碘酒或酒精消毒,纵向切开头皮,用止血钳将皮肤左右分开,用刀片刮去颅盖骨膜,或用双氧水腐蚀头盖骨膜,彻底去除骨膜后让Bregma点显现出来。用脑定位仪读取Bregma点数值作为三维坐标原点O。

        4. 侧脑室位置的定位,以眼间连线的中点为起点,垂直于眼间连线后移3-4 mm,然后侧移1.1 mm左右,向下3 mm左右,即进入侧脑室。

        具体的位置依据小鼠的脑大小确定,坐标值,即ML值(X轴)、AP值(Y轴)、DV值(Z轴)。侧脑室位置为前囟点旁开1.5 mm,向后囟方向1.1 mm,深2.0 mm(坐标即为±1.5,-1.1,-4.5)。调节X轴(1.5个单位)及Y轴(1.1个单位)旋钮移动操作臂到坐标位置。

        海马区域的位置,X= 1.5 mm, Y = 2 mm, Z= 1.5 mm。

        5. 10ul的微量注射器,注射剂量是2ul(两侧注射,各1 ul),打药时间2 min左右,打药之后再停留2 min,然后慢慢的拔出注射器针头。

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