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        人外周血树突状细胞的体外扩增。

        相关实验:人树突状细胞的培养

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        甘蔗妹妹

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        1 个回答

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        凌晨三点Dxy

        有帮助

        人外周血树突状细胞(DCs)的体外扩增通常需要从外周血单个核细胞(PBMCs)中分离出CD3+T细胞,并在培养基中添加刺激因子和生长因子,以促进DCs的分化和增殖。以下是一种常用的人外周血DCs体外扩增方法:


        1. 收集外周血单个核细胞(PBMCs):从健康人体内采集外周血,并通过密度梯度离心法分离出PBMCs。


        2. 分离CD3+T细胞:使用磁珠分选法或流式细胞术,从PBMCs中分离出CD3+T细胞。


        3. 培养基准备:将含有重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)和重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)的培养基准备好。这些因子可以促进DCs的分化和增殖。


        4. 诱导DCs分化:将CD3+T细胞与准备好的培养基混合,并在37°C、5%CO2的孵育箱中培养。在培养的早期阶段,DCs会表现出未成熟的表型,如低表达的表面分子和酶活性。随着时间的推移,DCs会逐渐成熟,并表现出高水平的表面分子和酶活性。


        5. 收集DCs:在培养的后期阶段,使用流式细胞术或磁珠分选法收集成熟的DCs。这些DCs可以用于进一步的研究或治疗应用。

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