求问在WB实验中，蛋白分子量有57kDa，73kDa，42kDa，25kDa,13kDa，转膜时各分子量蛋白时间如何控制？

分子量不同的蛋白也都这样跑？

我都这样跑的，除非你有非常精细的要求，但一般情况下直接转能满足是要需求了。对了，我都做的湿转，然后比较大的蛋白 (> 100 KDa)，会延长时间到 2h 左右，小蛋白 (< 25 kDa) 缩短时间至 30 min 左右，所以看你的蛋白差异其实并没有那么大，切胶分开转很麻烦，还容易出错，日常我直接转一整张膜，marker 都能转成功，说明体系问题不大。

谢谢您的回答。我不太明白您说的固定设置是指什么？我们用的黑胶白膜（也叫“三明治”），就是同一张膜上转不同分子量蛋白，小分子转的时间可能会短一些（可能20min左右），大分子的时间会长一些，那像这种情况您们会如何处理呢？