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WB中,目标蛋白分子量变大,已知其有糖基化修饰,但是蛋白样品上样前热煮变性了,分子量变大还可能是这个原因吗?
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糖基化修饰是一种蛋白质翻译后修饰,它涉及在蛋白质分子上共价连接糖分子。高温变性会导致蛋白质的三维结构被破坏,使得原本紧密折叠的二级、三级和四级结构变得松散或完全伸展为无规则线团(变性态)。然而,糖基化本身是通过稳定的共价键(通常是糖苷键)将糖与蛋白质残基相连,这种化学键并不会因温度变化而立即断裂。
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