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        转膜marker颜色很浅 且感觉条带飞了 是为什么

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        dxy_ovzeksq8

        图片描述230mA转了60min pvdf膜 

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        1 个回答

        user-title

        百泰派克-李工

        有帮助

        WB转膜出现以上情况可能是由下面几个因素造成的:

        1.膜转移效率不足:

        如果膜转移效率不高,可能会导致marker颜色浅。这可能是由于电转膜的电压或时间设置不当,或者使用的膜与蛋白质的亲和力不足。

        2.样品过载或电泳条件不当:

        如果样品加载过多或电泳条件不适宜(如电压过高或运行时间过长),可能导致蛋白质条带在凝胶中迁移不均匀,导致转膜后条带模糊或“飞了”。

        3.膜处理不当:

        在转膜过程中,膜的处理也非常重要。例如,PVDF膜需要预湿化处理,而NC或者其他类型的膜可能有不同的处理要求。处理不当可能影响蛋白质的转移效率和结合效果。

        4.染色或检测问题:

        如果使用的染色方法或检测技术不敏感,也可能导致条带颜色浅。此外,染色时间过短或过长都可能影响结果。

        5.膜保存不当:

        如果转膜后的膜保存不当,可能会导致蛋白质降解或者膜的性质改变,从而影响检测效果。

        为了解决这些问题,你可以尝试以下措施:

        如果上述措施仍然无法解决问题,可能需要更详细地检查整个实验流程,包括样品的制备、电泳条件、转膜系统的选择和操作,以及后续的染色和检测步骤。


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