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WB实验结果不同的原因是什么?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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幸福夜未眠

同样的条带下,同一蛋白没有重复出来,是为什么呢?不同公司的抗体,marker位置也不同,是为什么?

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5 个回答

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土井挞克树

有帮助

可能是蛋白降解,也可能是抗体的特异度差别太大,导致实验结果差距太大

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huarenqiang5

有帮助

主要考虑以下几点原因:

1.你蛋白的问题,虽然是同一批的,但是可能在蛋白表达与纯化过程中难免会出现个别的异类;

2.你的操作流程,不管做什么都会有误差,不可能每次的做的都一样,我们只能减少误差,所以可能你觉得自己每次都做得一样,但某个小细节你并没有发现;

3.试剂,也许你的试剂已经不能用了,或者溶度不对了都会影响你的实验。

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高山云初

有帮助

有可能是在显影液环节出的问题,在膜没有淋干净的情况下,上面残留参差不齐的 T/TBS,T/TBS 能稀释显影液,目的条带本来表达量就少,某一个点残留的 T/TBS 稍微多一点就可能导致显影效果下降

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feixue7758527w

有帮助

这个还是要考虑是不是抗体问题的,也是要看显影液是否合适的。

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sswei

有帮助

可能是在显影液环节,简单来说就是膜没有淋干净,上面残留参差不齐的 T/TBS,T/TBS 能稀释显影液,目的条带本来表达量就少,某一个点残留的 T/TBS 稍微多一点就可能导致显影效果下降

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