wb中，一抗敷完，可以泡在tbst里面第二天再敷二抗吗？

一定洗一下 不然影响最终效果 不建议这么操作，

不可以，效果会不好，泡Tbst时间长了会影响显色效果，问就是试过这样，出来很淡

不可以。wb中显完影pvdf膜放入第一抗体中,温和振荡30分钟后放入4C冰箱过夜,或着在室温下反应2小时后放入tbst中清洗30分钟,更换3到4次tbst。长时间在tbst中泡着会使wb中显完影的pvdf膜发生质变,从而导致实验失败。

一抗孵育过夜后要冲洗的，不要孵育过长时间会影响显影效果

不可以。一抗敷完后不能泡在tbst里面第二天敷二抗，因为长时间在tbst中泡着会使wb中显完影的pvdf膜发生质变，从而导致实验失败。

在Western Blot实验中，一抗孵育完毕后，通常需要先清洗薄膜以去除多余的一抗，然后再进行二抗孵育。在WB实验中，如果当天没有足够的时间进行二抗孵育，可以将膜在TBS或TBST中保存，但通常不建议在TBS或TBST中保存超过一天。如有需要，可以将膜放入密封袋中，放入4℃冰箱保存。但需要注意的是，在冰箱中长时间保存可能会影响蛋白质与抗体的结合效率，因此应尽量减少保存时间。第二天取出膜后，可以在室温下进行二抗孵育，以恢复活性。

可以泡在tbst里面第二天再敷二抗、一抗敷完头一天要洗的，如果由于未清洗一抗并未结合在膜上在二抗孵育清洗时也会洗掉，但是很可能会使你应该与二抗结合的一抗接触不到二抗或不均匀，造成条带不清异常，还有较强的非特异背景。

wb实验中，一抗敷完，可以泡在tbst里面第二天再敷二抗、一抗敷完头一天需要洗、