WB显影整张膜都是黑的

可能的原因：

1.过量的抗体：使用过量的抗体可能会导致非特异性结合，从而导致高背景值。

2.不当的洗膜条件：使用过于粗糙或过于缓慢的洗膜步骤可能会导致高背景值。

3.抗体过时或受损：过时或受损的抗体可能会导致高背景值。

4.蛋白质降解：样品中蛋白质降解可能会导致高背景值。

5.膜过于湿润： 膜过于湿润可能会导致高背景值6.检测抗体非特异性结合: 如果检测的抗体不是特异的，可能会有非特异性结合导致黑色背景。

第一可能封闭不彻底；第二可能TBST／PBST洗膜不完全。

控制TBST的ph值在7.4左右可以改善大片黑的情况，但是如果改善不了可能是抗体的问题

可能是封闭效果不好 脱脂奶粉容易结块 不可太多次重复利用

可能是蛋白降解了，或者是TBST的ph值太高影响抗原抗体结合