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        做WB时,小分子转膜时间怎么控制?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        user-title

        不想吃姜

        请问跑9kd的小分子时,转膜电流为220mA的情况下应该转膜多长时间合适啊?我看其他人做10-30kd的分子转膜时间是30min。但我转了25min没有看到条带,30min也没有。有大佬做过小分子的WB吗?想请教一下

        wx-share
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        4 个回答

        user-title

        是TTT

        有帮助

        普通Western转膜液200mA,一分钟转1kd,10-30kd转10-30分钟。小分子wb没有条带可能不在于转膜没成功,关键在电泳,可以调整下层胶浓度跑小分子蛋白

        user-title

        dxy_mqg1dtg8

        有帮助

        小分子在膜上的迁移速度较快,你可以尝试缩短转膜时间(10-15min);另外,可以使用高灵敏度的检测方法,比如ECL法。

        user-title

        相似又互补

        有帮助

        恒流,400ma30分钟,效果特别好

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        转膜时的电流可以加大到250mA,时间1h左右。时间宁可长一点。

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