做WB显影时，有背景色是为什么，跟二维码一样。
Gene_bunny
用的是10%的牛奶常温封闭2h，一抗1：500过夜，TBST洗7次，每次5分钟，二抗1：5000后也是TBST洗7次，每次5分钟。
4 个回答
balalaLy
可能是蛋白表达本来就比较低，另外tbst洗的次数太多了，建议提高tbst中土温的浓度，减少洗的次数
z流沙z
首先可以增加上样量，是目的条带更明显，另外一抗二抗也可以使用5%牛奶配制
loveliufudan
可能是以下几个原因导致的：
蛋白样品中有非特异性结合：如果蛋白样品中存在与次要抗体结合的非特异性成分，这些成分可能会与二抗结合，导致背景信号的出现。
一抗或二抗过度稀释：如果一抗或二抗过度稀释，可能会导致不完全结合，从而导致背景信号的出现。
特定蛋白结构的存在：某些蛋白质可能会形成特定的结构，这种结构可能会被次要抗体结合，从而导致背景信号的出现。
不充分的洗涤：洗涤步骤中的TBST洗涤液不够充分，可能会导致非特异性结合或次要抗体结合，从而导致背景信号的出现。
土井挞克树
是因为抗体特异性差，更换特异性高的抗体就好了
相关产品推荐
Influenza A H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) Hemagglutinin Protein (HA1 Subunit) (His Tag)
￥4520
4h快速WB即用型全流程试剂盒（WB检测试剂盒）(Western Blot Kit)
￥320
iBind(Flex) 蛋白质免疫印迹处理系统
询价
Cytochrome c 兔多抗（WB,IHC-P,ICC/IF）
￥999
Influenza A H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) Hemagglutinin / HA Protein (His Tag)
￥4520
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
