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        wb胶板的配制求助大佬解答

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        user-title

        hsq的山川

        请问一下各位大佬们,wb,分离胶用水压的,浓缩胶胶板配完之后发现两层胶交界处有类似孔样的波浪,不知道是什么原因,如何改善,太羡慕别人又直又好看的胶板了图片描述

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        4 个回答

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        分离胶用水压没有问题,我一直都是用水,那些痕迹可能是玻璃板上的脏东西或者是你配分离胶的时候有漏胶。另外,你的浓缩胶太长了,跑胶效果可能会没那么好。

        user-title

        hsq的山川user-title

        好的,后续会改进,这是第一次配,谢谢你的建议

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        感觉不是分离胶和水压的问题,1.你板子确定洗干净了,2,确定你的浓缩胶浓度时4%?并且是快速加入上层后,接着插入梳子,没有凝结?

        user-title

        hsq的山川user-title

        洗干净了,浓缩胶是用的5%,可能跟天气有关系吧

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        这种情况可能是在制备胶时出现了气泡,导致胶层的表面不光滑,形成了波浪状。下面是一些可能的原因和解决方案:

        制备胶液时未充分搅拌:在配制胶液时应充分搅拌,确保各组分充分混合。

        加入固体或粉末试剂过快或过多:加入试剂时应缓慢加入,避免过快或过多导致出现气泡。

        气泡未排除干净:在制备胶液时,应将制备好的胶液用真空泵除气,以去除气泡。

        浓缩胶时蒸汽过热:如果蒸汽温度过高,可能会导致胶板表面出现气泡。可以调整蒸汽温度,避免过热。

        气温、湿度等环境因素影响:制备胶板时应注意环境温度、湿度等因素的影响,尽量保持环境恒定。

        如果出现了波浪状的胶层表面,可以在制备胶液时加入适量的表面活性剂如Tween-20,能够降低胶液的表面张力,减少泡沫的形成。此外,可以试着将胶液滤过0.22微米的滤膜,以去除悬浮的颗粒和杂质。如果胶板已经制备好了,可以尝试在胶板表面喷洒一些无菌的70%酒精,然后轻轻按压波浪处,帮助气泡排出。

        user-title

        hsq的山川user-title

        好的,谢谢,我会注意一下这些细节的

        user-title

        申东熙老伯

        有帮助

        分离胶可以用丙醇或者乙醇压,这可能和板子没刷干净也有关。

        user-title

        hsq的山川user-title

        刷过了,不知道是不胶本身的问题,但没有影响跑胶结果

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