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        WB内参条带异常分析

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        user-title

        459X6BZ

        GAPDH,36KDa,10%的胶,浓缩胶80V40分,分离胶120V40分,转膜300mA60分,一抗稀释比例1:2000,二抗稀释比例1:3000,跑了三次几乎都没有正常条带,求分析异常原因图片描述

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        3 个回答

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        申东熙老伯

        有帮助

        目的条带能跑出来吗?可能是蛋白样品制备过程出了问题。

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        huarenqiang5

        有帮助

        主要考虑一抗或者二抗存在问题。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        根据提供的实验细节,以下是一些可能导致异常结果的原因:

        蛋白质样品浓度不足或纯度不高。可以尝试增加加载量或使用纯化的蛋白质样品。

        电泳条件可能需要调整。可以尝试改变电泳缓冲液或调整电泳时间/电压来优化电泳条件。

        蛋白质转移效率低。可以尝试调整转膜条件,如转膜时间、电流密度或使用不同的转膜膜。

        一抗或二抗的稀释比例可能需要重新优化。可以尝试不同的抗体浓度来确定最佳的稀释比例。

        增加免疫印迹的敏感性,可以使用荧光标记的二抗或使用增强信号的方法,如 ECL。

        需要进一步分析和排除这些潜在原因,以确定具体的问题所在。

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