求助，人精子蛋白的wb
考研狗努力
做了很多边人精子蛋白wb，从最开始调整提取，然后bca测定，都是能跑出来的蛋白量。但是就很奇怪，每次内参都特别好，偶尔目的蛋白出现，但是重做就做不出来目的蛋白了。因为我的目的蛋白是25kd。所以我电泳是80v 120v 然后转膜是300mA 30min湿转。可是目的蛋白有时候有大多出不来。这可怎么办啊
4 个回答
dxy_wye9d2p
有帮助
请问你使用的是什么内参，我用β-tubulin当内参一直跑不出来。
申东熙老伯
有帮助
可以试试增大蛋白上样量，转膜的时候降低电流，25算小条带，很容易转过。
土井挞克树
有帮助
内参正常，目的蛋白不正常首先排除上样量不足的问题，其次还有可能是抗体失效。
huarenqiang5
有帮助
考虑：1、蛋白质被降解掉了；2、抗体不能识别目的蛋白。
相关产品推荐
Influenza A H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) Hemagglutinin Protein (HA1 Subunit) (His Tag)
￥4520
4h快速WB即用型全流程试剂盒（WB检测试剂盒）(Western Blot Kit)
￥320
iBind(Flex) 蛋白质免疫印迹处理系统
询价
Cytochrome c 兔多抗（WB,IHC-P,ICC/IF）
￥999
Influenza A H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) Hemagglutinin / HA Protein (His Tag)
￥4520
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序