求助 | 光敏蛋白不表达

买的枢密的光敏蛋白，分别买了cre+dio和神经元特异性启动子两种，表达ChR2，分别在中缝核、蓝斑核和黑质致密部注射。注射速度50nl/min，停针10min。

注射后4周处死，切片观察荧光，结果只有黑质致密部的cre+dio有正常的表达，但也比较少。黑质致密部的特异性启动子表达比较弥散，哪哪都是纤维丝状的荧光，没有细胞膜上的表达。其他的位置都没有表达，能看到注射的针道，针道附近有一些散在的点状的荧光，针孔位置在目标核团的上方大概100um处。

不明白为啥不表达哇，坐标是之前打墨水验证过的，组里两个人分别做的，都没表达，枢密的技术就说是打歪了……

求助大家有没有遇到这种情况，是咋解决的哇？