wb翻车了，求解答

血管钙化欢迎交流

2022-09-05

各位大佬，最近新手刚开始跑wb，跑的好几次都是下面图片这样，一张膜只敷了一个贝塔-actin，上面有很多非特异性条带，抗体是单克隆新配的。新蛋白旧蛋白跑出来都是这样。有遇到过同样问题的嘛？

图片描述

Dr_劉医生

2022-09-05

有帮助

出现非特异性的杂带可能是抗体纯度不够，高纯度抗体条带特异性更好，建议更换抗体；此外也可以加长BSA封闭时间，和洗膜的时候多洗几次可以降低杂带干扰

灵枢天问

2022-09-05

有帮助

杂带这么多只能说你的抗体特异性不太好，换一种抗体试试

balalaLy

2022-09-05

有帮助

一抗：浓度高，适当稀释

封闭：不充分，用脱脂牛奶封闭

洗涤：适当延长洗涤时间

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