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        wb翻车了，求解答

        相关实验：蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)

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        血管钙化欢迎交流

        各位大佬，最近新手刚开始跑wb，跑的好几次都是下面图片这样，一张膜只敷了一个贝塔-actin，上面有很多非特异性条带，抗体是单克隆新配的。新蛋白旧蛋白跑出来都是这样。有遇到过同样问题的嘛？

        图片描述

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        3 个回答

        user-title

        Dr_劉医生

        有帮助

        出现非特异性的杂带可能是抗体纯度不够，高纯度抗体条带特异性更好，建议更换抗体；此外也可以加长BSA封闭时间，和洗膜的时候多洗几次可以降低杂带干扰

        user-title

        灵枢天问

        有帮助

        杂带这么多只能说你的抗体特异性不太好，换一种抗体试试

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        一抗：浓度高，适当稀释

        封闭：不充分，用脱脂牛奶封闭

        洗涤：适当延长洗涤时间

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