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        毕赤酵母表达无条带

        相关实验：蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)

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        dxy_qxv8q6lw

        我用ppic9k质粒转化到GS115中，经过遗传霉素筛选，菌落PCR验证是有条带的。

        但是我表达以后，甚至到120h以上都没有任何条带，不说目的基因，连杂带都没有一个，请问各位大神有知道的吗？在这里卡很久了，

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        2 个回答

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        菌落pcr有条带说明不了什么，因为它假阳性率很高，还是要送测序看看重组成功了么，然后诱导转化

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        可以试试一条用5‘AOX1，一条是你自己目的基因的特异性引物批一下，这样可以鉴定非定向克隆。这样应该就能比较准确的鉴定出是否将目的基因转进去了。

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