毕赤酵母表达无条带

dxy_qxv8q6lw

2022-07-11

我用ppic9k质粒转化到GS115中，经过遗传霉素筛选，菌落PCR验证是有条带的。

但是我表达以后，甚至到120h以上都没有任何条带，不说目的基因，连杂带都没有一个，请问各位大神有知道的吗？在这里卡很久了，

汤姆卜丽波

2022-07-13

有帮助

菌落pcr有条带说明不了什么，因为它假阳性率很高，还是要送测序看看重组成功了么，然后诱导转化

Eason老歌迷

2022-07-11

有帮助

可以试试一条用5‘AOX1，一条是你自己目的基因的特异性引物批一下，这样可以鉴定非定向克隆。这样应该就能比较准确的鉴定出是否将目的基因转进去了。

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