novagen镍柱纯化出现问题

柱子是新的么，把柱子按照说明书洗一下试试看会不会出现白色沉淀

锌离子在碱性条件下容易产生白色的沉淀，上样就开始有沉淀那你洗脱后沉淀还在上面的话也许是锌离子，也许是蛋白，所以你可以在同样条件下把样品放置看是不是容易沉淀。透析后产生棕色的沉淀也许是镍离子沉淀，因为在碱性条件下镍离子也容易沉淀，一旦镍离子被DTT还原会出现棕色的沉淀，至于白色沉淀那应该是蛋白本身的沉淀。理论上镍柱如果能抓出锌离子是不会出现沉淀的，所以沉淀还是蛋白本身的可能性更大。