WB内参还不错目的蛋白跑不出

内参最好根据目标蛋白所在细胞亚结构的位置进行选择。胞质内参很容易检出，但是目标蛋白位于胞核或者细胞器，细胞膜上检出就有困难，因为一时丰度低，普通蛋白提取会发生丢失，检测不到或者很弱就很正常了。可以试一下柱式法总蛋白提取方法，可以无差别提取细胞所有蛋白。这样就可以解决因蛋白丢失检测不出来的问题。

抗体的效果会不会不够？抗体不好的话的确很难出。

先确定你这个样品的目的是不是也在这个位置，然后确认抗体是不是没问题

有可能是没转上或者一抗不行，建议更换一抗试试

首先要确定你的抗体好使，有阳参么？或者你可以试试孵育一个全膜，看看你的目的条带具体出在什么地方。

内参还行看着，目的蛋白看不到可能是因为 ，一是你的抗体没有选择好，二是你转膜没有转上，三是你剪膜时候把条带剪掉了，四是你显影曝光没操作好。