为什么显影时除了目的蛋白，背景中的其他蛋白也有些显影？

过高的蛋白上样或一抗和二抗浓度过高都会促使底物过快地消耗，导致我们在做化学发光检测时，发光底物，已经消耗殆尽而形成空斑

一个可能是抗体浓度高，适当降低一抗浓度，

另一个可能是抗体用的次数多，重新配一支

实在不行就得重新买抗体了

是你抗体的特异性问题，会有非特异性条带，如果趋势一致，可以不用管它

背景有点脏，可能是你封闭没封闭到位。也可能是你的抗体的特异性不高。或者是你的洗膜没洗干净。

封闭时间太短。还有一抗的稀释度是多少？不能太高，还有加二抗前洗膜了没有，洗了多久？还有二抗的稀释度是多少？在追求特异性的角度下，可以尝试尽可能的降低二抗浓度。