wb实验曝光后目的蛋白连成一条线是什么原因呢？

上样量没有问题的话，大部分原因应该的胶的问题

跑胶的时候上样量较多可能导致其连成一线，可以适当减少上样量

这个有可能是胶没有配好，让下层胶充分凝固了再去配上层，也可能和电泳过程相关。

上样过程时间长，样品弥散，或者电压高发热。抗体也是影响因素

可以考虑以下几个原因:

1，曝光时间过长

2，样品量过大

3，一抗过多或作用时间过长

1.检查一下胶的质量等是否适合分离和鉴定目标蛋白。

2.紫外线呈像仪器的光源等照相设置是否正确。

3.回顾一下加样过程是否正确，跑电泳的时候正负极是否接反了。

问题出在电泳时，可能是加样过程中，样品溢出到别旁边的孔了，还可能是制胶的浓度有问题，也要考虑换个梳子，梳子的齿之间不要太密。

你蛋白量上的有点大，缩短一下曝光时间试试。

wb时连成一条线可能有以下几种原因： 1）上样量过大 这里指的是质量数过大，一般上样在20-100ug之间就可以，楼主可以减半上样量，试试看。 2）一抗孵育时间过长，适当缩短孵育时间，也可以改善。 3）一抗浓度过大 ，抗体如果很好用的话，增大稀释比例试试。 4）曝光时间过长，同样会由此现象。

1）上样量过大 这里指的是质量数过大，一般上样在20-100ug之间就可以，楼主可以减半上样量，试试看。

2）一抗孵育时间过长，适当缩短孵育时间，也可以改善。

3）一抗浓度过大 ，抗体如果很好用的话，增大稀释比例试试。

4）曝光时间过长，同样会由此现象。

1）上样量过大 这里指的是质量数过大，一般上样在20-100ug之间就可以，楼主可以减半上样量，试试看。
2）一抗孵育时间过长，适当缩短孵育时间，也可以改善。

1. 加样的时候样品飘出来，和旁边孔连通。加样的时候尽量加慢些。不要让样品飘起来。用好一点的SDS，下降效果更好