在样本制备和加样的过程中，所有会影响蛋白上样量的可能因素有哪些？如何提高蛋白上样量？

1、影响因素：样品浓度，蛋白裂解是否完全

2、可以浓缩样品，也可以根据你的目标分子量透析掉一部分小分子蛋白。一般地，超载30％是不会有问题的，建议尽量不超载加样。如果已经超了不少了，而且小分子量的也要，可以考虑加大胶的厚度，以增大上样孔体积，可以试1.5mm厚的胶。

影响因素有很多，比如裂解液体积、匀浆方式、一抗二抗浓度等。可以通过增加组织量和减少匀浆体积来增加上样浓度，也可以更换10孔来提高上样量

1.你可以试试提高抗体浓度，尤其是一抗浓度，2.因为不知道你们什么提的蛋白，在蛋白提取过程中，注意低温。3.加点磷酸酶和蛋白酶的抑制剂。