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同样的抗体同样的稀释比例,前一次可以敷出正常的条带,但是用于不同批次的相同处理的样品时敷出了反白的条带,是什么原因?如何解决?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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fqyd风轻云淡2

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3 个回答

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bamboopiggy

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反白条带出现,大概率是你蛋白浓度太高,出现了烧心现象,还来不及拍照,大量的辣根过氧化物酶就反应了,把发光试剂消耗掉了,从而没有光了。

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天一湖医者

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可能加入样本后渗入其他孔或漏出。因为内参表达高,可能不会显示出差异。加入样本时不均匀也可能会产生误差。制胶应保证均匀无气泡,玻璃板干净,这样才能保证结果一致可靠。

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未来9

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反白一般是目的蛋白含量太高或者一抗浓度偏高;调整蛋白含量,检查一抗有效性

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