为什么转膜之后用TBST越洗越淡？
马肥的马马肥的肥
一直都是用的80V湿转1.5h，以前转的都很好，marker颜色很深很清晰，后来不知道为什么，明明跑的是同样的蛋白，但是经常转完就很淡，要么就是转过了，要么就是没转够，后面用TBST洗5miundefined3次，封闭敷抗体，也是越洗越淡，到扫膜的时候已经几乎看不到marker了
5 个回答
桐轩456
有帮助
我觉得你如果用TBST洗5miundefined3次，封闭敷抗体，密闭室温改为2小时去试试。
bqejjh123
有帮助
可能是封闭液重复使用已污染了。
whilt-shirt
有帮助
在转膜之后先用丽春红染下看看蛋白是否完全转上，另外考虑转膜液和转膜滤纸是否有问题，建议更换新的转膜液和滤纸试试。
dxy_gwrp7ndq
有帮助
这个是强清洗剂，洗得多了会洗掉蛋白，要是所有条带都变浅了，但组间比较有差异就行了。
府宅
有帮助
封闭后一般都要用TBST洗3次，但一定要TBS再洗一次后加一抗。
相关产品推荐
Influenza A H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) Hemagglutinin Protein (HA1 Subunit) (His Tag)
￥4520
4h快速WB即用型全流程试剂盒（WB检测试剂盒）(Western Blot Kit)
￥320
iBind(Flex) 蛋白质免疫印迹处理系统
询价
Cytochrome c 兔多抗（WB,IHC-P,ICC/IF）
￥999
Influenza A H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) Hemagglutinin / HA Protein (His Tag)
￥4520
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序