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用的为特异性一抗,但是对照样品却跑出来相应位置的条带,是什么原因?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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努力培养小仙男

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4 个回答

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岳努力岳幸运

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有没有可能是western的两个孔道里的样品串道导致样品污染呢。当抗体效价足够高,也就是抗体比较好用的时候,或者你的样品量比较大的时候,一点点的污染都会导致出现条带。

试一试多做几个对照,并且对照样品和实验样品可以间隔一个孔道。适当少上蛋白样品或者适当稀释抗体重新做一下检测一下!

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CXF2017

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可能抗体制备的纯度不够高,也可能点样时旁边孔里的样品移散出来

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dxywode

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在这种情况下,一般考虑更换抗体。据我所知,有些公司的抗体,虽然在target位置出现“特异性”条带,但是靶向的并不是目的蛋白,而是其它蛋白。一抗可以考虑更换为rabbit

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whilt-shirt

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有可能是样本污染了,也有可能是抗体浓度过高

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