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        求教RTPCR非特异性信号多的原因及解决办法?

        相关实验:ELISA 实验

        user-title

        Kimser

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        2 个回答

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        whilt-shirt

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        1、引物为非特异性引物,优化扩增条件,可设置梯度Tm,摸索最佳的Tm值;2、引物浓度太高,适当降低引物浓度;3、可通过琼脂糖凝胶电泳确认引物二聚体;4、模板有基因组污染,重新逆转录cDNA

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        1)引物与靶序列不完全互补或引物聚合形成二聚体;

        2)Mg2+离子浓度过高、退火温度过低及PCR循环次数过多有关;

        3)其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增

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